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農(nóng)藥殘留

首頁-知識(shí)講堂-農(nóng)藥殘留

收藏|農(nóng)藥殘留檢測(cè)的主流檢測(cè)技術(shù)大盤點(diǎn)

發(fā)布時(shí)間:2023-08-19來源:后王電子

收藏|農(nóng)藥殘留檢測(cè)的主流檢測(cè)技術(shù)大盤點(diǎn)

農(nóng)藥殘留關(guān)系著食品安全,是重要的食品檢測(cè)的項(xiàng)目,現(xiàn)階段食品中農(nóng)殘的檢測(cè)方法多種多樣,除了最常用的光光度法、極譜法、原子吸收光譜法、薄層層析法、氣相色譜法、液相色譜法、同位素標(biāo)記法、核磁共振波譜法、色質(zhì)聯(lián)用法外,還有波譜、毛細(xì)管電泳、免疫分析和酶抑制法化學(xué)法、生物法等多種檢測(cè)技術(shù)。農(nóng)藥殘留關(guān)系著食品安全

什么是農(nóng)藥殘留

農(nóng)藥殘留(Pesticideresidues), 是農(nóng)藥使用后一個(gè)時(shí)期內(nèi)沒有被分解而殘留于生物體、收獲物、土壤、水體、大氣中的微量農(nóng)藥原體、有毒代謝物、 降解物和雜質(zhì)的總稱。什么是農(nóng)藥殘留

施用于作物上的農(nóng)藥,其中一部分附著于作物上,一部分散落在土壤、大氣和水等環(huán)境中,環(huán)境殘存的農(nóng)藥中的一部分又會(huì)被植物吸收。殘留農(nóng)藥直接通過植物果實(shí)或水、大氣到達(dá)人、畜體內(nèi),或通過環(huán)境、食物鏈最終傳遞給人、畜。農(nóng)殘剝離器可以降解 水果蔬菜表面的農(nóng)藥殘留。

01 農(nóng)藥殘留的生物測(cè)定技術(shù)(ABBA)

利用指示生物的生理生化反應(yīng)來判斷農(nóng)藥殘留及其污染情況。例如,可以用實(shí)驗(yàn)室養(yǎng)的敏感性家蠅為測(cè)定材料,以其接觸待測(cè)樣品后的中毒程度來表示該樣品中的殺蟲劑殘留;以病菌生長(zhǎng)受抑制的程度來檢測(cè)殺菌劑的殘留,以玉米或其它指示植物根長(zhǎng)受抑制的程度來檢測(cè)土壤中磺酰脲類除草劑殘留等。該方法無需對(duì)樣品前處理比較簡(jiǎn)單快速或無需進(jìn)行前處理,但對(duì)指示生物要求較高,測(cè)定結(jié)果不能確定農(nóng)藥品種,并且可能出現(xiàn)假陽性或假陰性的情況,該方法可作為快速檢驗(yàn)方法用于農(nóng)產(chǎn)品引起中毒或在現(xiàn)場(chǎng)使用。實(shí)驗(yàn)室養(yǎng)的敏感性家蠅

02農(nóng)藥殘留的理化檢測(cè)

用于農(nóng)藥殘留的化學(xué)檢測(cè)方法有分光光度法、極譜法、原子吸收光譜法、薄層層析法、氣相色譜法、液相色譜法、同位素標(biāo)記法、核磁共振波譜法、色質(zhì)聯(lián)用法等。自二十世紀(jì)九十年代以來,現(xiàn)代化學(xué)分析技術(shù)日新月異,許多新技術(shù)已進(jìn)入實(shí)用階段,如毛細(xì)管電脈儀技術(shù)(CZE),色質(zhì)聯(lián)用技術(shù)(GC-MS、HPLC-MS)超臨界流體色譜技術(shù)(SFC),直接光譜分析技術(shù)等。這些新技術(shù)的應(yīng)用,大大提高農(nóng)藥殘留分析的靈敏度,簡(jiǎn)化分析步驟,提高了分析效率。但是,這些分析方法有的靈敏度不高,如分光光度法、薄層層析法等。有的需要昂貴的儀器,如色質(zhì)聯(lián)用法、核磁共振波譜法等。還有的需要特殊的設(shè)備,如同位素標(biāo)記法等。因此,目前,普遍采用的還是氣相色譜法和液相色譜法,它們具有簡(jiǎn)便、快速、靈敏以及穩(wěn)定性和重現(xiàn)性好,線性范圍寬、耗資低等優(yōu)點(diǎn)。

(1)氣相色譜法(GC)

采用氣體作流動(dòng)相的色譜法,用于揮發(fā)性農(nóng)藥的檢測(cè),具有高選擇性、高分離效能、高靈敏度、快速和特點(diǎn),是農(nóng)藥殘留量檢測(cè)最常用的方法之一,目前用于農(nóng)藥殘留檢測(cè)的檢測(cè)器主要有電子捕獲檢測(cè)器(ECD)、微池電子捕獲檢測(cè)器(u-ECD)、火焰光度檢測(cè)器(FPD)、脈沖火焰光度檢測(cè)器(P-FPD)、氮磷檢測(cè)器(NPD)等。

(2)液相色譜法(HPLC)

采用液體作流動(dòng)相的一種色譜法,它可以分離檢測(cè)極性強(qiáng)、分子量大及離子型農(nóng)藥,可用于不易氣化或受熱易分解的農(nóng)藥的檢測(cè)。近年來,采用新型高效固定相、高壓泵和高靈敏度的檢測(cè)器,柱前和柱后衍生技術(shù)、以及計(jì)算機(jī)聯(lián)用等,大大提高了檢測(cè)效率、靈敏度、速度和操作自動(dòng)化程度。目前用于農(nóng)藥殘留檢測(cè)最多是紫外吸收檢測(cè)器(UV)、兩極管陣列檢測(cè)器(DAD)和熒光檢測(cè)器(FLD)。

(3)色質(zhì)聯(lián)用法(GC-MS,HPLC-MS)

氣相或液相與質(zhì)譜聯(lián)用,它既具備了色譜的高分離效能優(yōu)點(diǎn),而且具備了質(zhì)譜準(zhǔn)確鑒定化合物結(jié)構(gòu)的特點(diǎn),可同時(shí)達(dá)到定性、定量的檢測(cè)目的,特別適合于農(nóng)藥代謝物、降解物的檢測(cè)和多殘留檢測(cè)等,不過此法需要貴重儀器且操作繁雜困難,不適合于經(jīng)常性的檢測(cè)。一般可用來做最后的確認(rèn)工作。

(4)超臨界流體色譜(SFC)

是以超臨界流體作為流動(dòng)相的色譜體系,超臨界流體是指物質(zhì)處于臨界溫度和臨界壓力時(shí)的狀態(tài),介于氣、液態(tài)之間,兼有氣體和液體的某些物理特性,因此,超臨界流體色譜既有氣譜的快速、高效、靈敏的特點(diǎn),又有能檢測(cè)對(duì)熱不穩(wěn)定和大分子化合物的液譜的特點(diǎn)。

(5)毛細(xì)管電泳法(CE)

該方法是利用毛細(xì)管及高電壓(15-30KW)分離各種農(nóng)藥殘留物,非常適合于一些難于用傳統(tǒng)色譜法分離的離子化樣品的分離和分析,比HPLC有高10-1000倍的分析能力,而且所需之緩沖液具有不危害環(huán)境之特點(diǎn),在短時(shí)間(30分鐘)內(nèi)就可以完成定性及定量分析。

03常用農(nóng)藥殘留的快速檢測(cè)方法

(1)酶抑制法:酶抑制法

有機(jī)磷與氨基甲酸酯農(nóng)藥共為神經(jīng)系統(tǒng)乙酰膽堿脂酶抑制物,因此可以利用農(nóng)藥靶標(biāo)酶-乙酰膽用堿酯酶(AChE)受抑制的程度來檢測(cè)有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥。該方法目前已開發(fā)出了相應(yīng)的各種速測(cè)卡和速測(cè)儀。該方法檢測(cè)時(shí),蔬菜中的水份、碳水化合物、蛋白質(zhì)、脂等物質(zhì)不會(huì)對(duì)農(nóng)藥殘留物的檢測(cè)造成干擾,不必進(jìn)行分離去雜,節(jié)省了大量預(yù)處理時(shí)間,從而能達(dá)到快速檢測(cè)的目的,因此該方法具有快速方便、前處理簡(jiǎn)單、無需儀器或儀器相對(duì)簡(jiǎn)單,適用于現(xiàn)場(chǎng)的定性和半定量測(cè)定,目前的農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)就是用了該方法,已上升為農(nóng)業(yè)部行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。但該方法只能用于測(cè)定有機(jī)磷和氨基甲酸酯類殺蟲劑,其靈敏度和所使用的酶、顯色反應(yīng)時(shí)間和溫度密切相關(guān),經(jīng)酶法檢測(cè)出陽性后,需用標(biāo)準(zhǔn)儀器檢驗(yàn)方法進(jìn)一步檢測(cè),以鑒定殘留農(nóng)藥品種及準(zhǔn)確殘留量。農(nóng)藥殘留檢測(cè)儀

農(nóng)藥殘留檢測(cè)儀HW-SJ12NC采用酶抑制率法,根據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T5009.199-2003農(nóng)業(yè)部標(biāo)準(zhǔn)(NY/T 448-2001)和國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局標(biāo)準(zhǔn)(KJ201710)而專門設(shè)計(jì)的儀器,蔬菜農(nóng)藥殘留檢測(cè)儀其采用酶抑制原理和光電比色法原理研制而成??煽焖贆z測(cè)出蔬菜、水果、糧食、茶葉以及土壤中有機(jī)磷和氨基甲酸脂類農(nóng)藥殘毒。適用于各級(jí)農(nóng)業(yè)檢測(cè)中心、食品安全檢測(cè)機(jī)構(gòu)、農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)中心、市場(chǎng)監(jiān)督管理、農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)、衛(wèi)生防疫、環(huán)保、蔬菜生產(chǎn)基地、超市、賓館酒店等領(lǐng)域

(2)免疫分析法:

有放射性免疫分析、酶免疫分析、多組份分析物免疫分析、免疫傳感器分析等。最為常用的是酶聯(lián)免疫法(ELISA法),它主要是以抗原與抗體的特異性、可逆性結(jié)合反應(yīng)為基礎(chǔ)的農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法。依靠比色來確定農(nóng)藥殘留量。其方法優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng),靈敏度高,快速簡(jiǎn)便,可準(zhǔn)確定性定量,適用于現(xiàn)場(chǎng)分析;缺點(diǎn)是由于制備抗體較困難,可能會(huì)出現(xiàn)假陽性或假陰性現(xiàn)象。

該法利用化學(xué)物質(zhì)在動(dòng)物體內(nèi)能產(chǎn)生免疫抗體的原理,先將小分子農(nóng)藥化合物與大分子生物物質(zhì)結(jié)合成大分子,做成抗原,并使之在動(dòng)物體內(nèi)產(chǎn)生抗體,對(duì)抗體篩選制成試劑盒,通過抗原與抗體之間發(fā)生的酶聯(lián)免疫反應(yīng),依靠比色來確定農(nóng)藥殘留,它具有專一性強(qiáng)、靈敏度高、快速、操作簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn),試劑盒可廣泛用于現(xiàn)場(chǎng)樣品和大量樣品的快速檢測(cè),可準(zhǔn)確定性、定量。其檢測(cè)水平可達(dá)ng甚至pg級(jí)。

ELISA法廣泛應(yīng)用于食品中農(nóng)藥殘留如有機(jī)磷農(nóng)藥、有機(jī)氯農(nóng)藥、除草劑、氨基甲酸酯類農(nóng)藥、獸藥殘留(如氯霉素)、真菌毒素等的分析檢測(cè)上。作為一種快速篩選方法,ELISA法在分析復(fù)雜基體樣品時(shí),因?yàn)榛w干擾和交聯(lián)反應(yīng)等問題,往往存在假陽性的問題。因此如果需要對(duì)樣品進(jìn)行定量和確證還需要其他的分析方法。

由于受到農(nóng)藥種類多,抗體制備難度大、在不能肯定樣本中的農(nóng)藥殘留種類時(shí)檢測(cè)有一定的盲目性以及抗體依賴國(guó)外進(jìn)口等影響,酶聯(lián)免疫法的應(yīng)用范圍受到較大的限制,目前,我國(guó)市場(chǎng)上酶聯(lián)免疫法成品試劑盒依賴從國(guó)外進(jìn)口。

(3)化學(xué)法—速測(cè)靈法(紙片法)

“速測(cè)靈”法應(yīng)用的原理是具有強(qiáng)催化作用的金屬離子催化劑,使各類有機(jī)磷農(nóng)藥(磷酸酯、二硫代酸酯、磷酸胺)在催化作用下水解為磷酸與醇,水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng),使顯色劑的紫紅色退去變成無色。主要針對(duì)的是有機(jī)磷農(nóng)藥的殘留檢測(cè),特別是甲胺磷、對(duì)硫磷農(nóng)藥。這種方法采用化學(xué)反應(yīng)原理,避免了通常所使用生化方法(酶法)的缺點(diǎn)(酶的制備、保存以及反應(yīng)需比較嚴(yán)格的條件),靈敏度也達(dá)到一定的要求。但是此方法主要針對(duì)的是甲胺磷、對(duì)硫磷等較高毒性的有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的定性檢測(cè)。農(nóng)藥殘留快檢試劑盒深圳后王

農(nóng)藥殘留檢測(cè)試劑盒(紙片法)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 5009.199-2003《蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測(cè)》農(nóng)業(yè)部標(biāo)準(zhǔn)(NY/T 448-2001)和市場(chǎng)監(jiān)督管理總局發(fā)布快檢方法KJ 201710《蔬菜中敵百蟲、丙溴磷、滅多威、克百威、 敵敵畏殘留的快速檢測(cè)》可廣泛應(yīng)用于各級(jí)市場(chǎng)監(jiān)督管理部門、農(nóng)業(yè)系統(tǒng)、食品安全檢測(cè)機(jī)構(gòu)、農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)、農(nóng)批市場(chǎng)、蔬菜生產(chǎn)基地、商超等

(4)膠體金免疫層析法

膠體金免疫層析技術(shù)就是以膠體金為顯色媒介,利用免疫學(xué)中抗原抗體能夠特異性結(jié)合原理,在層析過程中完成這一反應(yīng),從而達(dá)到檢測(cè)的目的。膠體金免疫層析技術(shù)的原理是樣品中目標(biāo)物與膠體金標(biāo)記的特異性抗體結(jié)合,抑制抗體和檢測(cè)線(T線)上偶聯(lián)抗原的免疫反應(yīng),從而導(dǎo)致檢測(cè)線顏色深淺的變化。通過檢測(cè)線與控制線(C線)顏色深淺比較,對(duì)樣品中目標(biāo)物進(jìn)行定性檢測(cè)??蓮V泛應(yīng)用于各級(jí)市場(chǎng)監(jiān)督管理部門、農(nóng)業(yè)系統(tǒng)、食品安全檢測(cè)機(jī)構(gòu)、農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)、農(nóng)批市場(chǎng)、蔬菜生產(chǎn)基地、商超等。

膠體金檢測(cè)卡結(jié)果判讀:

目測(cè)法:膠體金檢測(cè)卡結(jié)果判讀

陰性(-): T 線顯色比C 線深或一致,表明樣品中藥物濃度低于檢測(cè)限或不含藥物殘留;

陽性(+):T 線顯色比 C 線淺或無顯色,表明樣品中藥物濃度高于檢測(cè)限;

無 效 :未出現(xiàn) C 線,可能操作不當(dāng)或檢測(cè)卡已失效。在此情況下,應(yīng)再次仔細(xì)閱讀說明書,并用新的檢測(cè)卡重新測(cè)試。

儀器判讀:

試劑盒檢測(cè)方法為定性比色法,用膠體金免疫層析分析儀檢測(cè)時(shí)需核對(duì)項(xiàng)目法具體操作方法請(qǐng)參考相關(guān)儀器使用說明書

(5)熒光定量法

農(nóng)藥殘留檢測(cè)卡(熒光定量法)具有靈敏度高,操作簡(jiǎn)便、結(jié)果準(zhǔn)確、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn),通過熒光免疫定量分析儀判讀,可以給出定量或者定性的檢測(cè)結(jié)果,避免人為判讀帶來的誤差。應(yīng)用熒光定量免疫層析技術(shù),在檢測(cè)卡的反應(yīng)區(qū)預(yù)先包被 C 線和 T 線,T 線與 C 線的熒光信號(hào)比值和待測(cè)樣本中的目標(biāo)物含量成反比。通過與配套熒光免疫分析儀內(nèi)置的標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)比,可快速簡(jiǎn)便準(zhǔn)確定量各種蔬菜、糧食谷物、乳品及其制品、食用油、加工食品樣品中藥物殘留的含量熒光定量法

農(nóng)藥殘留檢測(cè)卡(熒光定量法)特點(diǎn):

◇定量檢測(cè):檢測(cè)結(jié)果有具體濃度值;無需現(xiàn)場(chǎng)定標(biāo),樣品隨到隨檢;

◇靈敏度高:檢測(cè)限比傳統(tǒng)膠體金方法高1-3個(gè)數(shù)量級(jí),比普通熒光方法高2-5倍;

◇檢測(cè)時(shí)間短:20分鐘內(nèi)即可出結(jié)果。

◇結(jié)果準(zhǔn)確:抗基質(zhì)干擾強(qiáng),線性范圍廣;

◇操作簡(jiǎn)便:樣品前處理簡(jiǎn)單,操作簡(jiǎn)便,即使非專業(yè)人員也很容易掌握;操作簡(jiǎn)便

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